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Relation entre concentration en substrat et activité enzymatique. Ce TP est réalisé avec de la saccharase et permet d'aboutir à la notion de saturation de l'enzyme.

PROBLEMATIQUE : quelle est la cinétique d'une enzyme lorsque la concentration de celle-ci reste contante alors que la concentration en substrat augmente ?

PROTOCOLE EXPERIMENTAL

 Préparez 5 tubes à essais dans lesquels vous déposez 1 ml d’extrait de saccharase et respectivement  10 ml de solution de saccharose à 2g /l ; 5g/l ; 10g/l ; 20g/l ; 40g/l.  Placez les tous dans un bain-marie à 37°C.

1.      Rappelez comment se mesure l’activité d’une enzyme. Dans ce TP, précisez quel est le nom du substrat, le nom de l’enzyme.     

2.      Indiquez quel serait le témoin de cette expérience.

 3.      Evaluez la quantité de glucose formé dans chacun des tubes à l’aide des bandelettes réactives et remplissez le tableau des résultats.

RESULTATS

	Temps en minutes.
Concentration initiale en saccharose	5	15	25	35
Concentration en glucose ( g /l ).
2 g /l
5 g /l
10 g /l
20 g /l
40 g /l

 4.      A partir de votre tableau de résultats, ( exprimé en g/l/min ), tracez une courbe représentant l’évolution de l’activité enzymatique en fonction de la concentration en saccharose. Vos calculs se feront sur les 5 premières minutes, c’est-à-dire sur la vitesse initiale.

 5.     Interprétez vos résultats et concluez en répondant à la problématique.